Natrium nitrit atau sodium nitrit

        Natrium nitrit merupakan zat tambahan pangan yang digunakan sebagai pengawet pada pengolahan daging. Natrium nitrit sangat penting dalam mencegah pembusukan terutama untuk keperluan penyimpanan, transportasi dan ditribusi produk-produk daging. Natrium nitrit juga berfungsi sebagai bahan pembentuk faktor-faktor sensori yaitu warna, aroma, dan cita rasa. Oleh karena itu dalam industri makanan kaleng penggunaan zat pengawet ini sangat penting karena dapat menyebabkan warna daging olahannya menjadi merah atau pink dan nampak segar sehingga produk olahan daging tersebut disukai oleh konsumen.

       Menurut peraturan menteri kesehatan RI nomor 722/Menkes/Per/IX/88 tentang bahan tambahan makanan menyatakan bahwa kadar nitrit yang diijinkan pada produk akhir daging proses adalah 200 ppm. Sedangkan USDA (United States Departement Of Agriculture) membatasi penggunaan maksimum nitrit sebagai garam sodium atau potasium yaitu 239,7 g/100 L larutan garam, 62,8 g/100 kg daging untuk daging curing kering atau 15,7 g/100 kg daging cacahan untuk sosis. Bagi anak-anak dan orang dewasa pemakaian makanan yang mengandung nitrit ternyata membawa pengaruh yang kurang baik. Nitrit bersifat toksin bila dikonsumsi dalam jumlah yang berlebihan. Nitrit dalam tubuh dapat mengurangi masuknya oksigen ke dalam sel-sel atau otak. Menurut beberapa ahli kimia nitrit yang masuk ke dalam tubuh melalui bahan pengawet makanan akan bereaksi dengan amino dalam reaksi yang sangat lambat membentuk berbagai jenis nitrosamin yang kebanyakan bersifat karsinogenik kuat.

        Hasil penelitian Magee dan Barnes (1954) menunjukkan bahwa nitrosodimetilamin merupakan senyawa racun bagi hati yang dapat menyebabkan terjadinya kerusakan hati pada beberapa presies hewan termasuk manusia. Penelitian lebih lanjut menunjukkan nitrisodimetilamin juga merupakan kasinogen kuat, yang dapat menimbulkan tumor terutama pada hati dan ginjal tikus pecobaan.

         Dari hasil percobaan terhadap tikus, 500 ppm dari nitrosamine menyebabkan tumor hati malignant dalam waktu 26 – 40 minggu. Pada dosis yang lebih tinggi lagi menyebabkan tumor kandung kemih. Pada dosis 30 mg/kg berat badan akan badan mempercepat timbulnya tumor ginjal. Tabel berikut menyajikan hubungan antara jumlah dosis dengan waktu timbulnya?kanker dari penggunaan?nitrosamin.

Tabel 1 DOSIS NITROSAMIN DAN WAKTU TIMBULNYA KANKER

Jumlah nitrosamine per kg berat badan	Waktu timbulnya kanker tanpa factor lain
0,30 mg	500 hari
0,15 mg	605 hari
0,075 mg	830 hari

          Penyakit kekurangan gizi atau disebut juga dengan istilah Malnutrition disebabkan kekurangan satu atau lebih zat gizi yang dikonsumsi. Di dalam makanan terdapat kurang lebih 50 zat gizi yang berbeda-beda, maka kekurangan gizi dapat beraneka ragam jenisnya. Agar tubuh kita terpenuhi kebutuhan gizinya, maka perlu penambahan satu atau lebih zat gizi ke dalam makanan kita. Teknik penambahan zat gizi tersebut fortifikasi. Fortifikasi biasanya dilakukan hanya terbatas pada kekurangan gizi yang sangat spesifik seperti kekurangan vitamin A, zat besi, protein dan asam amino.

       Semakin berkurang dan meluasnya teknik fortifikasi dalam makanan menimbulkan sinyalemen-sinyalemen tentang kemungkiman keracunan akibat kelebihan vitamin A dan vitamin D pada anak-anak dari masyarakat lapisan menengah ke atas di Indonesia. Dikatakan bahwa kelebihan vitamin A dan vitamin D ini terutama berasal dari komsumsi susu formula dan susu bubuk yang umumnya diperkaya atau ditambah sejumlah vitamin A atau vitamin D oleh para produsennya.

Metode Analisa Kualitas Air

Metode Analisa

     Penetapan-penetapan berikut ini dilakukan untuk menentukanmutu air permukaan :

1. Analisa temperature

Cara metode ini digunakan untuk menetapkan suhu air dan air limbah dengan termometer air raksa. Air raksa dalam termometer  akan memuai atau menyusut sesuai dengan panas air yang diperiksa, sehingga suhu air dapat dibaca pada skala thermometer (°C).

   Peralatan

         Termometer air raksa yang mempunyai skala sampai 110°C.

    Penetapan contoh uji air permukaan.

a.       Termometer langsung dicelupkan ke dalam contoh uji dan biarkan 2 menit sampai  dengan 5 menit sampai thermometer menunjukan nilai stabil.

b.      Catat pembacaan skala thermometer tanpa mengangkat lebih dahulu thermometer dari air.

                                    

   Penetapan contoh uji air pada kedalaman tertentu.

a.       Pasang thermometer pada alat pengambil contoh uji.

b.      Masukan alat pengambil contoh uji ke dalam air pada kedalaman tertentu untuk mengambil contoh uji.

c.       Tarik alat pengambil contoh uji sampai ke permukaan.

d.      Catat skala yang ditunjukan thermometer sebelum contoh air dikeluarkan dari alat pengambil contoh

          Referensi

 Badan Standardisasi Nasional. 2005. SNI 06-6989.23. ICS No. 13.060.01

2. Analisa Total Dissolved Solid (TDS)

      Untuk mengukur kandungan padatan terlarut, sampel yang sudah dihomogenkan disaring menggunakan kertas saring fiber glas. Filtratnya kemudian diuapkan hingga kering pada oven dengan suhu T 180^oC dalam cawan porselin yang diketahui bobotnya. Pertambahan bobot cawan merupakan bobot padatan terlarut dalam sampel.

        Peralatan

a.       Analytical Balance

b.      Oven Pemanas (104+2^oC)

c.       Desikator

d.      Filtering Apparatus

e.         Glass Fibre Filter

f.       Hot plate

g.      Cawan porselen

h.      Gelas beaker

i.        Pinset

Prosedur Analisa

1.     Persiapan

1.         Bilas cawan porselen dengan akuades sampai bersih, kemudian dipanaskan di oven sampai kering yang sebelumnya diberi label/nomor terlebih dulu.

2.         Keluarkan cawan dari oven dan masukkan ke dalam desikator sampai dingin lalu ditimbang (bobot kosong).

2.   Penyaringan  sampel

1.         Siapkan peralatan penyaring yang betul-betul bersih, lalu pasangkan kertas saring pada peralatan penyaring tersebut.

2.         Saring 20 mL air akuades, buang saringannya (hanya untuk membilas saja).

3.         Saring 100 mL sampel, pindahkan ke botol plastik kemudian diberi nomor/label.

4.         Untuk sampel air laut volume yang disaring adalah 50 mL.

Keterangan: Jika TDS > 500 mg/L, analisa dikerjakan dengan cara Gravimetri

  Jika TDS < 500 mg/L, analisa dikerjakan dengan alat Conductivitimeter

3.    Analisis Sample

1.         Letakkan cawan di atas hot plate dan biarkan sebentar untuk menghindari kontaminasi.

2.         Tuangkan sampel yang sudah disaring ke dalam cawan sedikit demi sedikit. Untuk sampel air laut harus dilakukan secara hati-hati karena kalau menuangkan sampel terlalu banyak akan menyebabkan letupan dari air garam sehingga mengakibatkan berkurangnya hasil penimbangan.

3.         Atur suhu hot plate sehingga menjadi 180^oC.

4.         Lanjutkan penambahan sampel ke dalam cawan sampai habis dan menguap, tapi tidak boleh dibiarkan kering.

5.         Pindahkan cawan ke dalam oven (105^oC) selama satu jam sampai mengering sempurna.

6.         Pindahkan cawan ke dalam desikator  sampai dingin, lalu ditimbang.

          Perhitungan

        TDS (mg/L) = bobot kering (mg) – bobot  kosong (mg) x 1000

volume sample (mL)

         Referensi

Standard Methods for Examination of Water and Wastewater, American Public Health Association (APHA) 21^st ed. (2005), Method 2540 C (Total Dissolved Solids Dried at 180^oC)

3.      Analisa Total Suspended Solid (TSS)

      Sampel yang telah dikocok dengan merata disaring melalui filter serat gelas standar yang telah ditimbang sebelumnya lalu residu yang tersisa dikeringkan pada suhu 103^o-105^oC hingga bobot tetap. Kenaikan bobot dari filter tersebut merepresentasikan Total Suspended Solid atau Total Padatan Tersuspensi.

    

       Peralatan

a.       Analytical Balance

b.      Oven Pemanas (104±2^oC)

c.       Desikator

d.      Cawan aluminium

e.       Filtering Apparatus

f.       Glass Fibre Filter

g.      Gelas beaker

h.      Gelas ukur

i.        Pinset

     

Prosedur Analisa

1.      Cuci semua peralatan yang akan dipakai untuk menyaring dengan menggunakan akuades sampai bersih.

2.      Siapkan cawan alumunium masing-masing diberi nomor atau label untuk tiap sampel yang akan diukur, kemudian masukkan ke masing masing cawan tersebut fiber glass filter.

3.      Cawan alumunium kosong harus dipanaskan selama 24 jam untuk kemudian didinginkan di dalam desikator lalu ditimbang untuk menetapkan bobot cawan kosongnya.

4.      Siapkan peralatan untuk menyaring (filtering apparatus) kemudian letakkan fiber glass filter di atasnya lalu dibilas dengan 20 mL akuades

5.      Kocok sampel yang akan dianalisa kemudian tuangkan sebanyak 150 mL dengan menggunakan gelas ukur.

6.      Bilas dinding saringan dengan menggunakan akuades sampai tidak ada kotoran yang menempel pada dinding tersebut.

7.      Untuk sampel air laut harus dibilas dengan akuades sebanyak 250 mL.

8.      Setelah sampel disaring, ambil fiber glass filter dari atas alat penyaring kemudian tempatkan ke dalam cawan yang telah diberi tanda atau label, lalu dikeringkan di dalam oven pada suhu 105^oC selama satu malam.

9.      Setelah keesokan harinya ambil fiber glass filter dan cawan alumuniumnya kemudian masukkan ke dalam desikator hingga dingin lalu ditimbang hingga bobot tetap.

Perhitungan

TSS (mg/L) =[bobot cawan + sampel kering (mg)]– [bobot cawan kosong (mg)] x 1000

Volume sample (mL)

Referensi

Standard Method for Examination of Water and Wastewater, American Public Health Association (APHA) 21^st.   Edition (2005), Method 2540 D (Total Suspended Solid Dried at 103-105^oC)

4.      Analisa Derajat Keasaman Menggunakan Alat pH Meter

      Pada suhu tertentu sifat asam atau basa air ditunjukan oleh nilai pH-nya atau aktivitas ion hidrogennya. Alkalinitas maupun keasaman adalah kemampuan untuk menetralkan asam atau basa air. Sedangkan kapasitas penyanggan dinyatakan dalam molal per liter. pH adalah –log[H⁺] yang ditetapkan dengan metode pengukuran secra potentiometri dengan menggunakan pH meter.

         Peralatan dan  Bahan

         Peralatan

a.            pH meter dengan perlengkapannya;

b.            Piala gelas 250mL;

c.             Pengaduk gelas atau magnetic;

d.            Kertas tissue;

e.             Timbangan analitik; dan

f.             Termometer.

Bahan

Larutan penyangga 4, 7 dan 10 yang siap pakai dan tersedia dipasaran, atau dapat juga dibuat dengan cara sebagi berikut:

1. Larutan penyangga, pH 4,004 (25°C)

Timbang 10,12g kalium hydrogen ptalat, KHC₈H₄O₄, larutkan dalam 1000mL air suling.

2. Larutan penyangga, pH 6,863  (25°C).

Timbang 3,387g kalium dihidrogen fosfat, KH₂PO₄ dan 3,533g dinatrium hydrogen fosfat, Na₂HPO₄, larutan dalam 1000mL air suling.

3. Larutan penyangga, pH 10,014 (25°C)

Timbang 2,092 natrium hirogen karbonat, NaHCO₃ dan 2,640g natrium karbonat, Na₂CO₃, larutkan dalam 1000mL air suling.

       Prosedur

       Persiapan pengujian

a. Lakukan kalibrasi alat pH-meter dengan larutan penyangga sesuai instruksi kerja alat setiap kali akan melakukan pengukuran.

b.  Untuk contoh uji yang mempunyai suhu tinggi, kondisikan contoh uji sampai suhu kamar.

        Prosedur Analisa

a.                   Keringkan dengan kertas tissue selanjutnya bilas elektroda dengan air suling.

b.                  Bilas elektroda dengan larutan uji.

c.                   Celupkan elektroda ke dalam contoh uji sampai pH meter menunjukan pembacaan yang tetap.

d.                  Catat hasil pembacaan skala atau angka pada tampilan dari pH meter.

        Referensi

Badan Standardisasi Nasional. 2004. Air  dan air limbah-Bagian 11: Cara uji derajat keasaman dengan alat pH meter. SNI 06-6989.11. ICS No  13.060.50

5.      Analisa 5 Day Biological Oxygen Demand (BOD5)

      Metode ini digunakan untuk menentukan jumlah oksigen yang diperlukan mikroba untuk degradasikan  senyawaan organik secara biokimia dalam air dan juga termasuk oksigen yang diperlukan untuk mengoksidasi senyawaan anorganik seperti sulfide dan fero.

Umumnya perairan yang telah tercemar atau air limbah mengandung senyawa organik yang memerlukan oksigen melebihi kelarutan oksigen dalam air. Sehingga dalam hal ini diperlukan pengenceran air, sehingga terjadi kesimbangan antara bahan jumlah organic yang dioksidasi dengan dengan jumlah oksigen yang diperlukan d dalam contoh air yang akan di ukur nilai BOD₅nya

Dalam pertumbuhan bakteri diperlukan hara seperti nitrogen, fosfor dan logam-logam maka di dalam air pengencer ditambahkan unsur tersebut dan untuk menjaga pH tetap konstan (6,5 – 7,5) maka ditambahkan larutan penyangga.

         Peralatan dan  Bahan

   Peralatan

1.      Botol BOD kapasitas 250 -  300mL

2.      Inkubator suhu 20 ± 1°C

3.      Buret  50mL

4.      Pipet 25, 50mL

5.      Erlemeyer 250mL

6.      Analitycal balance

   Bahan

1.         Larutan penyangga (buffer) fosfat

Larutan 8,5g KH₂PO₄; 21,75g K₂HPO₄; 33,4g Na₂HPO₄.7H₂O dan 1,7g NH₄Cl ke dalam 500mL air suling kemudian encerkan menjadi 1L. Nilai pH larutan ini harus 7,2.

2.         Larutan Magnesium Sulfat

Larutkan 22,5g MgSO₄.7H₂O kedalam air suling lalu encerkan sampai 1L.

3.         Larutan kalsium klorida.

Larutakan 27,5g CaCl₂  kedalam air suling lalu encerkan sampai 1L.

4.          Larutan feri klorida

        Larutkan 0,25g FeCl₃.6H₂O kedalam air suling lalu encerkan sampai 1L.

5.       Larutan asam atau basa 1N: untuk menetralkan contoh air.

6.     Larutan Natrium Sulfit

        Larutkan 1,575g Na₂SO₃ kedalam 1 L air suling. Larutan ini dibuat pada saat akan dipergunakan.

        Prosedur

Pembuatan air pengencer.

      Tambahkan masing-masing 1mL larutan penyangga fosfat, MgSO₄, CaCl₂ dan FeCl₃ kedalam 1 liter air suling yang akan dipergunakan sebagai pengencer.

     Perlakuan awal contoh air

1)      Contoh air yang mengandung alkalinitas disebabkan oleh soda dan juga mengandung keasaman maka netralisasi contoh dengan asam sulfat atau larutan natrium hidoksida encer sehingga pH air contoh menjadi 6.5 - 7.5.

2)      Jika contoh mengandung reidu klorin, maka tambahkan Na₂SO₃ untuk menghilangkannya

Pengukuran

1.      Lakukan teknik pengenceran ke dalam botol BOD

-          Untuk air limbah yang belum diolah maka pengencerannya berkisar antara 0,0 – 1,0%

-          Untuk air limbah yang telah mengalami pengendapan pengenceran berkisar 1,0 – 5,0%

-          Untuk air limbah yang sudah mengalami pengolahan secarabiologis pengencerannya : 5 – 25%

2.      Inkubasi contoh kedalam incubator selama 5 hari pada suhu 20°C.

3.      Segera ukur DO mula-mula (initial) dari air contoh yang diencerkan (biladilakukan pengenceran) atau contoh yang tidak diencerkan.

         Perhitungan

BOD mgO₂/L = ((XO_o -  XO₅) – (BO₀ – BO₅)) x (1-P)

                                                              P

XO₀= DO dari contoh air 0 hari (saat itu juga)

XO₅= DO dari contoh air 5 hari.

BO₀= DO dari blanko  0 hari (saat itu juga)

BO₅= DO dari blanko  5 hari

P=  fraksi pengenceran.

        Referensi

Standard Methods for Examination of Water and Wastewater, American Public Health Association (APHA) 21^st ed. (2005), Method 5210B

7.      Analisis Chemycal Oxygen Demand (COD) Dengan Refluks Tertutup Secara Spektrofotometer

Metode ini digunakan untuk penentuan kebutuhan oksigen kimiawi KOK atau COD dalam air dan air limbah secara refluk terbuka dengan kisaran kadar KOK atara 50mg/L O₂ sampai dengan 900 mg/L O₂. Metode ini tidak berlaku bagi contoh uji air yang mengandung ion klorida lebih besar dari 2000mg/L

Zat organic dioksidasi dengan campuan mendidih asam sulfat dan kalium dikromat yang diketahui normalitasnya dalam suatu refluk selama 2 jam. Kelebiahn kalium dikromat yang tereduksi, dititrasi dengan larutan ferro ammonium sulfat (FAS).

         Peralatan dan  Bahan

         Peralatan

g.           Peralatan refluks, yang terdiri dari labu erlenmeyer, pendingin Liebig 30cm;

h.           hot plate atau yang setara;

i.             labu ukur 100mL dan 1000mL

j.             buret 25mL atau 50mL;

k.           pipet volume 5mL; 10mL; 15mL dan 50mL;

l.             erlenmeyer 250mL (labu refluk); dan

m.         neraca analitik.

    Bahan

      a.  Standar kalium dikromat 0.2500N

Larutkan 12.259g K₂Cr₂O₇ yang telah di keringkan pada 150°C selama 2 jam kedalam air suling dan encerkan sampai 1L.

b.      Larutan perak asam Sulfat.

Larutkan 10.19 g Ag₂SO₄  kedalam 1L H₂SO₄ pekat, secara perlahan sampai Ag₂SO₄ larut sempurna (1- 2 hari)

c.       Larutan indikator feroin.

Larutkan 1.485g 1,10-phenanthroline monohydrate dan 695mg FeSO₄.7H₂O kedalam air suling sampai 100mL.

d.      Larutan penitar standar fero ammonium sulfate (FAS) 0.25M.

Larutkan 98g Fe(NH₄)₂(SO₄)₂.6H₂O kedalam air suling. Tambahkan 20mL H₂SO₄ pekat dan dingin.

e.       Cristal atau serbuk asam sulfamat

Hanya digunakan jika ada gangguan nitrit, 10mg asam sulfamat untuk 1mg nitrit.

f.       Larutan baku kalium hidrogen ptalat (KHP)

Larutkan 425mg KHP (yang telah di haluskan dan dikeringkan pada 110°C), dalam air suling dan tepatkan sampai 1000mL. Larutan ini mempunyai kadar KOK 500mg/L O₂. Bila disimpan dalam refrigerator dapat digunakan sampai 1 minggu selama tidak ada pertumbuhan mikroba.

g.      Serbuk merkuri sulfat, HgSO₄

h.      Batu didih

         Prosedur

   Standardisasi FAS

-          Pipet 25.00mL larutan standard K₂Cr₂O₇ 0.25N kedalam erlemeyer dan tambah air sampai 100mL.

-          Titrasi dengan larutan penitar FAS dengan mengunakan 0.10 sampai 0.15mL (2-3 tetes) indicator feroin.

Prosedur Analisa

-    Pipet  10mL larutan contoh kedalam erlemeyer 250mL

-    Tambahkan 1g HgSO₄ dan perlahan-lahan 5.0mL larutan perak asam sulfat, diaduk sampai HgSO₄ larut dan beberapa batu didih.

-    Tambahkan 10mg asam sulfamat jika konsentrasi NO₂^-  2mg/L atau lebih.

-          Tambahkan 25.00 mL K₂Cr₂O₇ 0.25N dan aduk.

-          Pasang erlemeyer dengan pendingin reflux dan nyalakan air pendingin. Tambahkan 25mL larutan perak asam sulfat sambil erlemeyer di goyang. Setelah selesai penambahan aduk dengan kuat. Hitupkan alat pemanas.

-          Tutup ujung atas kondensor yang terbuka, kemudian destruksikan selama 2 jam.

-          Setelah selesai dinginkan dan bilas dengan air suling. Dinginkan sampai suhu kamar dan tirasi dengan FAS dengan mengunakan 2-3 tetes indicator feroin.

-          Lakukan blanko dengan cara yang sama.

          Perhitungan

 Normalitas Larutan FAS

N Larutan FAS=    V olume larutan K₂Cr₂O₇ (mL)          x 0.2500 N

                               Volume FAS yang diperlukan (mL)

Kadar COD

COD sbg mgO₂/L =  (A - B) x N x 8000

                          

                                         ml sampel

Keterangan:

A= mL FAS diperlukan pada blanko

B= mL FAS diperlukan pada sample

N= Normalitas FAS

8000= mg ekivalen oksigen x 1000ml/L

Persen temu balik (%Recovery)

Pembuatan spike matrix:

a.       pipet 25mL contoh uji dan tambahkan 25mL larutan baku KHP.

b.      Lakukan pengukuran COD seperti ponit 8.2.1 sampai dengan 8.2.7

% Recovery = (D - E) x 100%

                           F

Dengan pengertian:

D         adalah kadar uji yang di spike, mg/L

E          adalah kadar contoh uji yang tidak di spike, mg/L

F          adalah kadar standar yang ditambahkan (target value), mg/L.

            Dimana

            F= ( y ) ( z) / v

            y                         adalah volume larutan baku yang ditambahkan, mL;

            z             adalah kadar larutan baku, mg/L

            V                        adalah volume akhir contoh uji yang spike, mL

        Referensi

1.      Standard Methods for Examination of Water and Wastewater, American Public Health Association (APHA) 21^st ed. (2005), Method 5220 B (open reflux method).

2.      Badan Standardisasi Nasional. 2004. SNI 06-6989.15. ICS No. 13.060.50

8.      Metode Analisa Dissolved Solid (DO)

Kandungan oksigen terlarut (DO) dalam perairan alami maupun air limbah sanga tergantung pada sifat fisik, kimia dan aktivitas biokimia dalam air tersebut. Analisis DO merupakan parameter kunci yang dapat menentukan tingkat pencemaran perairan maupunjenis pengolah air limbah yang diperlukan.

Metode Winkler dengan modifikasi azide cocok untuk menganalisis DO dari contoh- contoh air limbah, air permukaan terutama jika contoh air mengandung N-NO₂ lebih besar dari 0.05 mg/L atau ion fero tidak lebih dari 1 mg/L.

Pada metode ini contoh air dalam botol Winkler ditambahkan larutan MnSO₄ (mangan II) diikuti dengan penambahan larutan alkali kuat, oksigen terlarut yang terdapat dalam contoh air akan segera mengoksidasi mangan II menjadi mangan yang bervalensi lebih tinggi. Adanya ion Iodida dalam larutan yang bersuasana asam akan menyebabkan mangan bervalensi tiga berubah kembali menjadi mangan bervalensi dua bersamaan dengan perubahan ini akan terbentuk Iod bebas yang jumlahnya setara dengan jumlah oksigen terlarut yang terdapat dalam contoh air. Iod ini kemudian dititrasi dengan larutan tiosulfat dengan indicator amilum.

         Peralatan dan  Bahan

   Peralatan

a.       Botol Winkler

b.      Pipet volume 5mL; 10mL; dan 50mL

c.       Buret

d.      pipet ukur 5mL

e.       erlenmeyer 125mL

f.       gelas piala 400mL; dan

g.      labu ukur 1000mL

    Bahan

1)      Larutan MnSO4

Larutkan 120g MnSO₄.4H₂O atau 100g MnSO₄.2H₂O atau 91g MnSO₄.H₂O kedalam air suling, saring dan kemudian encerkan menjadi 250mL dengan air suling.

2)      Larutan Alkali – Iodida -  Azide

Larutkan 125g NaOH dan 37.5g KI ke dalam air suling, encerkan menjadi 250mL. Larutkan 10g NaN₃ ke dalam 40mL air suling. Campurkan larutan kedua larutan tersebut.

3)      Asam sulfat pekat.

4)      Larutan Kanji.

Campurkan 1.25g kanji ke dalam sedikit air suling dingin sehingga membentuk suspensi. Tuang larutan ini kedalam 200mL air suling yang mendidih sambil diaduk. Encerkan menjadi 250 mL dan didihkan beberapa menit, diamkan semalam kemudian ambil bagian yang jernih. Awetkan larutkan ini dengan 0.3125g asam salisilat atau dengan menambahkan beberapa tetes toluene.

5)      Larutan Standar Tiosulfat 0.025N

Didihkan air suling beberapa menit, kemudian dinginkan. Larutkan 3.1025g Na₂S₂O₃.5H₂O kedalam air suling tersebut dan encerkan menjadi 500mL. Awetkan larutan ini dengan menambahkan 2.5mL chloroform atau 0.2 g NaOH atau 2g Borak.

6)      Larutan Standar Dikromat

Timbang 0.613g K₂Cr₂O₇  (yang telah dikeringkan pada 150°C selama 2 jam) dan larutkan ke dalam air suling, tepatkan sampai 500mL.

                    

        Prosedur

 Persiapan pengujian

1)      Sediakan botol winkler.

2)      Masukan contoh uji ke dalam botol winkler sampai meluap, hati-hati jangan sampai terjadi gelembung udara, kemudian tutup rapat jangan sampai ada gelembung udara didalam botolnya.

3)      Lakukan pengujian contoh uji segera setelah contoh uji di ambil.

        Prosedur Penetapan larutan Tio Sulfat dengan kalium dikromat

1)      Larutakan 4.904 g K₂Cr₂O₇ (pa) yang telah di keringkan pada 150°C selama 2 jam kedalam sair suling dan larutkan samapi 1000mL untuk mendapatkan larutan 0.1000N. Simpan di botol tertutup.

2)      Pipet 10mL K₂Cr₂O₇ 0.1000N  kedam erlenmeyer tambahkan 80mL air suling tambahkan 1mL H₂SO₄  pekat dan 1g KI, aduk dan simpan ditempat gelap selama 6 menit.

3)      Titar Iod yang dibebaskan dengan menggunakan larutan Tio sulfat samapi warna kuning muda.

4)      Tambahkan larutan indicator amilum/kanji lanjutkan titrasi sampai warna biru tepat hilang.

5)      Hitung normalitas larutan Na₂S₂O₃ dengan rumus sebagai berikut:

N Na₂S₂O₃ = N₂ x V₂

                        V₁

           

Dengan pengertian:

            V₁        adalah mL Na₂S₂O₃

                V₂        adalah mL K₂Cr₂O₇ yang digunakan

            N₂        adalah Normalitas K₂Cr₂O₇

Prosedur penetapan kadar oksigen terlarut (DO)

1)      Ambil contoh yang sudah disiapakan.

2)      Tambahkan 1mL MNSO₄ dan 1mL alkali iodide azida dengan ujung pipet tepat di atas permukaan larutan.

3)      Tutup segera dan homogenkan hingga terbentuk gumpalan sempurna.

4)      Biarkan gumpalan menegndap 5 menit sampai dengan 10 menit.

5)      Tambahkan 1mL H₂SO₄ pekat, tutup dan homogenklan hingga endapan larut sempurna.

6)      Pipet 50mL, kemudian masukan ke dalam erlenmeyer 150mL.

7)      Titrasi dengan Na₂S₂O₃ dengan indicator amilum/kanji sampai warna biru tepat hilang.    

        Perhitungan

Oksigen Terlarut (mg O₂/L) = V x N x 8000 x F

                                                   50

Dengan pengertian :

V                        adalah mL Na₂S₂O₃;

N                        adalah normalitas Na₂S₂O₃;

F             adalah factor (volume botol dibagi volume botol dikurangi volume pereaksi MnSO₄ dan alkali iodide azida).

        Referensi

Badan Standardisasi National. 2004. Air dan air limbah bagian 14: Cara uji oksigen terlarut secara yodometri (modifikasi azida).

9.      Analisa NH3-N (Amonia)

 

       Metode fenat ini digunakan untuk menentukan kadar amonia pada sample air dan air limbah. Amonia bereaksi dengan hipoklorit dan fenol yang dikatalisis oleh natrium nitroprusida membentuk senyawa biru indofenol. Absorbansi indofenol ini sebanding dengan konsentrasi ammonia yang diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 640 nm dengan menggunakan kuvet 1 cm.

         Peralatan dan  Bahan

   Peralatan

10.  Spectrofotometer dengan panjang gelombang  640 nm.

11.  Pipet ukur 10 mL, 25 mL

12.  Pipet volum 1 mL

13.  Labu ukur 100 mL, 1000 mL

14.  Gelas ukur 100 mL

15.  Erlenmeyer 50 mL

16.  Analitycal balance

Bahan

1.      Larutan Fenol (C₆H₅OH)

Campurkan 11,1 mL fenol cair ( ≥ 89%) dengan etil alkohol 95% sampai volume 100 mL

(Catatan : larutan ini harus disiapkan setiap minggu)

2.      Latutan Natrium Nitroprusida (C₅FeN₆Na₂O) 0,5%

Larutkan 0,5 gram natrium nitroprusida dengan akuades dan encerkan sampai volume 100 mL. Simpan pada botol amber dan dapat disimpan selama 1 bulan.

3.      Larutan Natrium Hipoklorit (NaClO) 5%

4.          Larutan Alkalin Sitrat (C₆H₅Na₃O₇)

Larutkan 200 gram trinatrium sitrat dan 10 gram NaOH dengan akuades, kemudian encerkan sampai volume 1000 mL.

5.          Larutan Pengoksidasi

Larutkan 100 ml larutan alkalin sitrat dengan 25 ml natrium hipoklorit.

6.          Larutan Standar Induk  Amonia (1000 mg N/L)

Larutkan 3,819 gram amonium klorida (NH₄Cl) (yang telah dikeringkan pada suhu 100^oC) dengan akuades, kemudian encerkan sampai dengan volume 1000 mL

7.          Larutan Standar Baku Amonia (10 mg N/L)

Larutan 10 ml standar induk amonia dengan akuades, kemudian encerkan sampai volume 1000 mL.

         Prosedur

    Kalibrasi

Buat larutan standar kerja amonia masing-masing dari larutan standar baku 10 mg N/L  menjadi volume 100 ml dengan  konsentrasi sbb. :

No	Konsentrasi Larutan Standar Kerja(mg/L)	Volume Penambahan Larutan Standar Induk (ml)
1	Blanko	0,0
2	0,1	1,0
3	0,2	2,0
4	0,3	3,0
5	0,5	5,0

Lakukan analisa absorbansi sesuai dengan prosedur 8.2.  Buat kurva kalibrasi antara konsentrasi larutan standar dengan hasil pembacaan absorbansinya.

Yakinkan bahwa  koefesien korelasi (R²) dari kurva kalibrasi adalah  ≥ 0,995   Catat nilai  R² , slope dan intersep dalam kertas kerja.

 Prosedur Analisa

1.       Pipet 25 mL sample, kemudian masukkan ke dalam erlenmeyer 50 mL

2.       Tambahkan 1 mL larutan fenol, kemudian homogenkan.

3.       Tambahkan 1 mL larutan natrium nitroprusida, kemudian homogenkan

4.       Tambahkan 2,5 mL larutan pengoksidasi, kemudian homogenkan

5.       Tutup Erlenmeyer dengan paraffin film.

6.       Diamkan selama t 1 jam, untuk pembentukan warna.

7.       Kemudian masukkan sample ke dalam kuvet, dan ukur absorbansi pada panjang gelombang 640 nm.

         Perhitungan

Buat kurva standar (kurva kalibrasi) antara konsentrasi larutan standar dengan hasil pembacaan absorbansi nya, sehingga diperoleh persamaan garis regresi linier. 

 Y = A + BX,   

 Dimana ,            Y= absorbansi

               X = konsentrasi

               A = Intersep

               B = Slope

Konsentrasi amonia (mg N/L)  =  Absorbansi – Intersep  ,     dikalikan faktor pengenceran jika ada

                                                              Slope

        Referensi

Standard Methods for Examination of Water and Wastewater, American Public Health Association (APHA) 21^st ed. (2005), Method 4500-NH₃ F (Phenate Method)